Проба крови у крс

Материалом для исследований служит плазма крови, полученная в условиях, максимально исключающих доступ воздуха в пробу. Количество резервной щелочности и кислотной емкости крови. Кислотная емкость крови,. Неэстерфицированные жирные кислоты — летучие свободные жирные кислоты ферментируются микрофлорой рубца, являются промежуточным продуктом обмена липидов и внутренним источником энергии многокамерных животных. Ряд исследователей считают, что глюкоза, образованная из пропионовой кислоты определяет ежедневный удой.

Физиологический предел:. Кетоновые тела. Кетоновые тела определяют йодометрическим методом. Последний соединяется с йодом, образуя комплексное соединение. При помощи гипосульфата свободный йод оттитровывают и по разности между контролем и опытом определяют связанный йод.

Материал для исследований — безбелковый фильтрат крови. Количество кетоновых тел в крови у здоровых животных. Увеличение количества кетоновых тел в крови называется — кетонемия. Пировиноградная кислота. Один из основных метаболитов глюкозы, является связующим звеном в обмене белков и углеводов, промежуточный продукт превращения аминокислот. Интенсивность белкового и жирового обмена обуславливается интенсивностью углеводного и наоборот.

Поэтому показатель содержания пировиноградной кислоты может быть использован в качестве характеристики углеводного обмена. Пировиноградную кислоту определяют фотоколориметрическим методом.

Полезные материалы

Материал для исследования — стабилизированная кровь. Количество пировиноградной кислоты в крови животных. В крови животных активность обоих ферментов очень мала, однако при патологиях их количество в крови увеличивается. Каждому органу свойственна выработка своего набора спектра ферментов, появление их в жидкостях организма в больших количествах характерно для поврежденного органа.

АЛТ и АСТ распространены в тканях сердца, печени, скелетной мускулатуре, почках, меньше в поджелудочной железе, селезенке, легких. Исследование активности АЛТ и АСТ в сыворотки крови имеет важное значение для дифференциальной диагностики болезней печени.

Принцип метода:. Материал для исследования — сыворотка крови. Куры в плазме крови. Холестерин определяется энзиматическим или колориметрическим методом. Интенсивность в этом случае прямо пропорциональна концентрации;. Образовавшийся и имеющийся в пробе холестерин окисляется кислородом воздуха под действием холестеролоксидазы с образованием эквимолярного количества перекиси водорода.

Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации холестерина в пробе. Материал для исследования негемолизированная сыворотка крови. Количество холестерина в сыворотке крови животных. Мелкий рогатый скот. Креатинин представляет собой конечный продукт метаболизма креатина, синтезируемого в почках и печени из трех аминокислот аргинина, глицина, метионина. Креатинин полностью выделяется из организма почками путём клубочковой фильтрации, не реабсорбируясь в почечных канальцах.

Это свойство креатинина используется для исследования уровня клубочковой фильтрации по клиренсу креатинина в моче и сыворотке крови. Количество креатинин в сыворотке крови животных. Каротин витамин А сыворотке крови:. Повышенные показатели : наблюдается при поражении эндокринной системы. Резервная щелочность плазмы крови:. Сахар глюкоза крови:. Общий кальций в сыворотке крови:. Неорганический фосфор в сыворотке крови:.

Остаточный азот в сыворотке крови:. Общий белок сыворотки крови:. Альбумины в сыворотке крови:. Повышенные показатели : дегидратация. Глобулины в сыворотке крови:. Гамма-глобулины сыворотки крови:. Кетоновые тела в крови:.

Условия взятия крови и ее сохранность до начала лабораторных исследований имеют важное значение при получении достоверных результатов. Во многом эти результаты зависят от техники взятия крови и используемых при этой инструментов. На результаты лабораторных исследований могут влиять факторы, связанные с индивидуальными особенностями и физиологическим состоянием организма животного, такие как: возраст; эмоциональное состояние и психический стресс; климатические и метеорологические условия и др. В целях отсутствия получения ложно-положительных результатов исследований рекомендуют брать кровь не позднее, чем за три недели до отела и не ранее чем через 3 недели после отела.

Пониженные показатели : недостаток протеина, заболевания печени,. Пониженные показатели : Нарушение функции почек почечная недостаточность , гипертиреоз, применение фуросемида, витамина С. Пациенты с диабетическим кетоацидозом могут иметь ложно завышенный уровень креатинина. Повышенные показатели : Беременность.

Биохимические показатели. Повышение содержания. Снижение содержания. Мало того, реакции обмена веществ предельно согласованы между собой. Правильным будет также заметить, что биохимическое исследование не несет в себе ответы на все вопросы. На начальных этапах многие патологические процессы имеют сходную картину развития. Следовательно, правильный диагноз можно поставить только в связи с анамнезом и другими исследованиями. Таким образом, несмотря на видимый прогресс биохимического исследования крови, открыты еще далеко не все возможности.

Вероятно, спустя некоторое время появятся ультраточные качественные и количественные реакции, которые постепенно займут место нынешних. Таблица перевода традиционных биохимических показателей.

Традиционные единицы. Коэффициент перевода. Единицы СИ. Билирубин общий. Холестерин общий. Кальций общий. Фосфор неорганический. Витамин А. Лимонная кислота. Молочная кислота. Общие липиды. Кормление высокопродуктивных животных — под ред. Лабуды и П. Кормление сельскохозяйственных животных — А. Дмитроченко и П. Москва — стр. Биохимия животных.

Анализ биохимических показателей крови

Фундаментальные и клинические аспекты — С. Выделение геномной ДНК можно проводить любым другим методом, позволяющим получить нуклеиновую кислоту, пригодную для амплификации в ПЦР.

Смесь набирают непосредственно перед амплификацией, прогревают 5 мин. Если после 25 - 30 циклов реакции в пробе не обнаруживается специфический фрагмент анализ электрофорезом в агаровом геле , то отбирают аликвоту 2 - 4 мкл и переносят в новую пробирку, содержащую реакционную смесь с внутренними праймерами так называемая "Nested""-ПЦР , и проводят еще 25 - 30 циклов амплификации в том же режиме.

Такая реамплификация позволяет увеличить как чувствительность, так и специфичность реакции. Через 20 - 30 мин. Для идентификации специфического фрагмента используют стандартные маркеры - наборы фрагментов ДНК известной длины.

При просмотре геля в ультрафиолете присутствие фрагмента определенного размера свидетельствует о наличии в пробе провирусной ДНК. Метод заключается в подсчете количества лейкоцитов в единице объема крови 1 мкл и качественной оценке лимфоидных элементов - лимфоцитов. Объектом гематологического исследования являются периферическая кровь, пунктаты костного мозга, селезенки, лимфоузлов.

Гематологические исследования позволяют выявлять больных животных, а также проводить дифференциальную диагностику форм и стадий болезни. Кровь для гематологических исследований берут из яремной вены в пробирки с антикоагулянтами. Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают. Подсчет количества лейкоцитов при помощи электронного счетчика частиц типа "Целлоскоп", "Культер", "Пикоскел" выполняют в соответствии с наставлением инструкцией по их эксплуатации.

Наряду с указанными счетчиками в настоящее время выпускаются модели полуавтоматических счетчиков клеток крови, автоматические анализаторы, позволяющие определять от 4 до 20 параметров, то есть проводить развернутый анализ крови, включая полную дифференцировку лейкоцитов нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, моноциты и лимфоциты , расчетные показатели красной крови и тромбоцитов и т.

Автоматической пипеткой или стеклянным капилляром набирают 0,02 мл предварительно перемешанной крови. Марлевой салфеткой протирают наружную поверхность наконечника пипетки или капилляра от крови и переносят содержимое на дно пробирки лунки с жидкостью Тюрка. В подготовленную для работы камеру Горяева при помощи пипетки вносят разведенные в жидкости Тюрка предварительно пропипетировав пробы крови от двух животных.

Для удобства учета проб в верхнюю половину вносят нечетные, а в нижнюю - четные пробы. Если в камере будут обнаружены пузырьки воздуха, то ее перезаряжают вновь. Выждав 1 - 2 мин. В каждом малом или большом квадрате считают клетки, находящиеся внутри них, а также лежащие на левых и нижних линиях и в левых углах квадрата. Клетки, которые не входят частично в квадрат со стороны верхней и правой линий, а также в правых углах, досчитывают в следующем, рядом лежащем квадрате.

Подсчитывают обычно клетки в больших квадратах. Пример: В квадратах подсчитано клеток. Степень разведения крови Лейкоцитов в 1 мкл будет:. При массовых гематологических исследованиях можно ограничиться подсчетом клеток в 25 квадратах. С левого верхнего угла сетки по 4 квадрата в каждом ряду по диагонали вниз направо подсчитывают количество клеток в 20 квадратах. Затем по правой границе сетки поднимаются вверх и подсчитывают клетки в 4 квадратах в верхнем правом и в одном левом нижнем углах сетки.

Число клеток в 25 квадратах следует умножить на При достаточном навыке врач-гематолог может определять пробы заведомо нормальной крови, исходя из общей картины распределения клеток в поле зрения микроскопа, оцененной визуально без поклеточного подсчета при однократном и достаточно быстром перемещении в вертикальном направлении всей сетки камеры Горяева.

В этом случае в ведомости вместо количества лейкоцитов ставится индекс "N" норма. Пробы, вызвавшие даже самое малое подозрение на лейкоцитоз, подлежат подсчету в или 25 квадратах камеры, как указано выше.

При подсчете лейкоцитов необходимо обращать внимание на точность взятия определенного объема крови и разбавления ее, зарядки камеры и подсчета клеток. Дифференцированный подсчет лейкоцитов выведение лейкоцитарной формулы проводят при обнаружении повышенного количества их. Для этой цели готовят мазки крови.

Приготовление мазков крови. Мазки готовят на чистых обезжиренных предметных стеклах с ровной, гладкой поверхностью, без царапин и шероховатостей. Новые стекла моют в теплой мыльной воде, затем в проточной, протирают чистой сухой хлопчатобумажной тканью и помещают на 1 - 2 суток в банку со смесью спирта и эфира в равных частях.

проба крови у крс

После этого стекла вынимают из банки, насухо вытирают чистым полотенцем и по 10 - 20 штук завертывают в пергаментную бумагу.

Мазки готовят из нативной или стабилизированной крови на обезжиренных предметных стеклах. Для приготовления мазка стекло берут в левую руку между большим и указательным пальцами за короткие грани.

Каплю крови наносят на правый конец стекла. Она должна быть такого размера, чтобы конец мазка, приготовленного из нее, не доходил на 1 см до края стекла. Шлифованное стекло ставят впереди капли крови, надвигают до прикосновения с ней и равномерным движением делают мазок.

Хорошо приготовленный мазок должен быть тонким, ровным и при просмотре на свет отливать цветами радуги. После высушивания на воздухе мазки маркируют простым карандашом или иглой, указывая номер экспертизы, инвентарный номер или кличку животного, дату приготовления мазка, и фиксируют в метиловом спирте 3 - 5 мин. Окраска мазков крови по Романовскому-Гимза. Окрашивают мазки в течение 20 - 30 мин. Затем краску многократно смывают дистиллированной водой и мазки высушивают на воздухе.

Качество окраски контролируют под микроскопом. В правильно окрашенном мазке ядра клеток приобретают красно-фиолетовый цвет, цитоплазма лимфоцитов - голубой, а цитоплазма нейтрофилов - розовый. Окраска по Паппенгейму. Для ее проведения применяют две краски. Вначале нефиксированный мазок обрабатывают краской Май-Грюнвальда в течение 3 мин. В препаратах крови, окрашенных этим методом, цветовые оттенки ядер и цитоплазмы, характерные для отдельных видов клеток, получаются отчетливее, чем при окраске по Романовскому-Гимза.

Лейкоцитарную формулу лейкограмму выводят по результатам дифференцированного подсчета клеток в окрашенных мазках крови под микроскопом с иммерсионной системой. При подсчете предметное стекло продвигают по зигзагообразной линии в направлении к концу мазка. Для счета дифференцированных клеток используют клавишный счетчик. Количество отдельных элементов крови в лейкоцитарной формуле выражают в процентах.

Абсолютное количество лимфоидных элементов в 1 мкл крови определяют путем умножения количества лейкоцитов на общий процент лимфоцитов и молодых клеток в лейкоцитарной формуле и деления полученного произведения на Показатель абсолютного количества лимфоцитов оценивают затем по "лейкозному ключу", указанному в таблице.

Количество лейкоцитов и лимфоцитов в 1 мкл крови у здорового, подозрительного по заболеванию и больного лейкозом крупного рогатого скота дает основание, согласно "лейкозному ключу", указанному в таблице, оценивать статус животного по лейкозу. Если количество лейкоцитов в пробе крови у животного, с учетом возраста, будет меньше числа, указанного во 2-й графе таблицы, то результат исследования на лейкоз считают отрицательным -.

При повторном подтверждении диагноза их считают больными. Дифференцированный подсчет количества лейкоцитов можно проводить с помощью фазово-контрастного микроскопирования крови в камере Горяева.

проба крови у крс

Состав фазово-контрастного устройства. Основные части устройства - фазовые объективы и фазовый конденсор. Объективы для наблюдения методом фазового контраста отличаются от обычных ахроматических только тем, что в плоскости выходного зрачка объектива нанесено фазовое кольцо, а на корпусе выгравирована буква "Ф". Фазовый конденсор отличается от обычного наличием кольцевых диафрагм, помещенных в фокальной плоскости конденсора; диафрагмы вставляются в револьверный диск и применяются в соответствии с выбранным объективом.

Конденсор может быть использован для наблюдения обычным способом; для этого в диске револьвера, кроме кольцевых диафрагм, имеется свободное отверстие для пропускания всего пучка света.

Фазовый конденсор вставляется в кольцо кронштейна конденсоров микроскопа и зажимается винтом обычным способом. Кольцевые диафрагмы, в зависимости от применяемого объектива, сменяют поворотом револьверного диска за накатанную часть до фиксации, причем в окне кожуха конденсора должна появиться цифра, соответствующая увеличению применяемого объектива, или буква "О", соответствующая свободному отверстию.

Вспомогательный микроскоп МИР-4 применяют при центрировке изображения кольцевой диафрагмы конденсора относительно фазового кольца объектива. Вспомогательный микроскоп вставляют в тубус микроскопа вместо окуляра и после выполнения центрировки снова заменяют окуляром.

Установить в кольцо кронштейна конденсоров фазовый конденсор; при этом в окне кожуха конденсора должна быть буква "О". Поместить на предметный столик препарат заряженную камеру Горяева и сфокусировать микроскоп на сетку камеры. Вставить вместо окуляра вспомогательный микроскоп и, перемещая его окуляр боковым винтом, сфокусировать на фазовое кольцо объектива.

Включить вращением револьверного диска конденсора требуемую кольцевую диафрагму; при этом в окне кожуха конденсора должна появиться цифра, соответствующая увеличению выбранного объектива, а во вспомогательном микроскопе, помимо фазового кольца, видно светлое кольцо диафрагмы. Совместить с помощью центрировочных винтов светлое кольцо с темным кольцом. Если светлое кольцо остается шире темного, передвижкой конденсора по высоте следует добиться, чтобы оно полностью вписывалось в темное кольцо.

Для достижения большей контрастности рекомендуется пользоваться цветным светофильтром. После смены объектива необходимо заново проверить центрировку изображения кольцевой диафрагмы относительно фазового кольца. Фазово-контрастное микроскопирование проб крови в камере Горяева позволяет достаточно надежно дифференцировать лимфоциты от остальных лейкоцитов. Ядра лимфоцитов правильной округлой формы, неблестящие, структура хроматина выглядит мелкосетчатой, более плотная к центру.

Ядра нейтрофилов -неправильной формы, блестящие. Другие лейкоциты эозинофилы, моноциты и др. Проводят дифференцированный подсчет лимфоцитов и отдельно - всех остальных лейкоцитов в 25 больших квадратах камеры Горяева.

Для клинико-биохимического исследования отбираются образцы мочи и молока. Согласно данным анамнеза, оценки среды, результатам проверочных исследований крови, молока и мочи КРС с учетом частоты проявлений недостаточности каких-либо факторов питания определяется масштаб количество животных и длительность проведения обследований необходимого клинико-биохимического анализа. Первичные изменения в физиологическом статусе животных, вызванные неполноценностью кормления КРС, как правило, проявляются в отклонении от нормы показателей ряда веществ в биологических жидкостях и в тканях повышение, понижение концентрации или появление нежелательного вещества. Метаболический профиль биологических жидкостей, соответствующий норме, может иметь особенности для данного стада, поэтому для более точной интерпретации данных целесообразна организация систематического контроля мониторинга биохимических показателей и накопление информации с применением компьютерной техники.

При этом можно пользоваться клавишным счетчиком лейкоцитов: на каждую пробу отводят по две клавиши одну для лимфоцитов, другую для всех остальных клеток - нелимфоцитов. Эти значения затем оценивают по "лейкозному ключу" см. Иногда могут возникать затруднения в дифференцированном подсчете лимфоцитов что случается достаточно редко и, как правило, связано со значительным омоложением клеток лимфоидного ряда.

По морфологии большая часть таких клеток значительно отличается от лимфоцитов и нейтрофилов. Ядра полиморфные, в той или иной степени увеличенные, но блестящие.

Хроматин выглядит грубодисперсным. В таких случаях подсчитывают общее количество лейкоцитов и готовят мазки крови, по которым выводят лейкоцитарную формулу по методике, описанной в п.

Признаки лейкоза у коров

Животных, подозрительных по заболеванию лейкозом, подвергают через 1 - 2 месяца дополнительному гематологическому исследованию. Клинические признаки лейкоза чаще проявляются у животных в возрасте 4 - 7 лет и обусловлены той или иной локализацией опухолевого процесса и вызванным им нарушением функции соответствующего органа. Чаще отмечают нарушения репродуктивной и пищеварительной функций нарушение половых циклов, гипотония преджелудков , ослабление деятельности сердечно-сосудистой системы отеки в области шеи, подгрудка, подчелюстного пространства, живота.

При пальпации иногда обнаруживается увеличение лимфатических узлов - подчелюстных, околоушных, поверхностных шейных, надвымянных, коленной складки. Иногда в области шеи или голодных ямок могут быть увеличены подкожные лимфатические узлы. При ректальном исследовании самок на стельность следует обращать внимание на возможное увеличение тазовых лимфатических узлов, утолщение стенок матки. Последнее имеет место при вовлечении органа в лейкозный процесс.

В зависимости от стадии и формы лейкоза наблюдаются локальные или генерализованные опухолевые поражения лимфоузлов, селезенки и других органов. Внутренние лимфоузлы поражаются чаще, чем наружные. Лейкозы, как и другие заболевания, могут иметь острое, подострое и хроническое течение. Болезнь протекает волнообразно циклически : фазы обострения сменяются частичными клинико-гематологическими ремиссиями различной длительности.

По прошествии кризисного периода в случае благоприятного исхода состояние животного полностью нормализуется.

Для чего делают биохимический анализ крови у КРС

Кризис, возникший на фоне значительного омоложения лимфоидных клеток периферической крови, завершается смертью животного. В последний период жизни у коров, больных лейкозом, резко снижается молокоотдача, часто, но не всегда, наблюдается прогрессирующее исхудание, локальное на голове и холке выпадение шерстного покрова.

Следует клинически дифференцировать лейкоз от болезней нелейкозной природы, сопровождающихся сходными синдромами. При вскрытии трупов или послеубойном осмотре туш и органов животных обращают внимание на величину органов, распространенность опухолевых разрастаний, их связь с лимфатическими узлами или другими органами и тканями.

При формах лейкоза с системным поражением кроветворных органов лимфоидный, недифференцированный и миелоидный лейкоз они увеличены равномерно, не сращены с окружающими тканями. Капсула снимается легко, на разрезе лимфоузлы серо-белого цвета, сочные и саловидные. При формах лейкоза типа гематосарком - лимфосаркоме, гистиоцитарной саркоме и лимфогранулематозе, характеризующихся системным поражением органов кроветворения, и гистиоцитарном лейкозе лимфатические узлы бугристые, их капсула сращена с паренхимой; на разрезе часто обнаруживают кровоизлияния и некрозы.

В органах брюшной, тазовой полостей, на серозных оболочках при этих формах болезни отмечают диффузные или узловатые опухолевые разрастания серо-белого или желто-серого цвета, сочные, саловидные на разрезе. При миелоидной форме лейкоза пульпа селезенки красно-малинового цвета, фолликулы плохо заметны, а в отдельных участках неразличимы, ткань органа рыхлой консистенции с кровоизлияниями.

При остальных формах системных лейкозов селезенка буро-красного цвета с четко выраженной красной и белой пульпой за счет гиперплазии фолликулов. В более поздней стадии болезни граница между белой и красной пульпой стерта.

При всех формах лейкоза отмечают очаговые или диффузные разрастания серо-белого или серо-розового цвета в печени, почках, в сердечной мышце, органах пищеварения, матке, скелетной мускулатуре и других органах в случае их поражения. Сущность метода заключается в обнаружении у больных лейкозом животных диффузных или очаговых разрастаний пролифератов из размножающихся, преимущественно нарушивших нормальное созревание и дифференцировку кроветворных клеток как в органах кроветворения костный мозг, селезенка, лимфатические узлы , так и в соединительной ткани других органов.

Для исследования вырезают кусочки селезенки, лимфатических узлов, грудной кости, печени, почки, легких, сердца, органов пищеварения, в случае их поражения, матки и скелетных мышц толщиной 0,5 - 1 см, площадью 3 - 4 см 2. Вырезают кусочки так, чтобы рядом с измененной тканью были участки нормальной ткани.

Патологический материал помещают в стеклянную или пластиковую банку с широким горлом и плотно закрывающейся крышкой. Вместе с отобранным патологическим материалом помещается этикетка из плотной бумаги, на которой графитным карандашом указывают дату и инвентарный номер животного. Материал от нескольких животных можно фиксировать в одном сосуде, используя индивидуальные марлевые мешочки для каждого животного. Объем фиксирующего раствора должен в 10 раз превышать объем патологического материала; фиксирующий раствор через 24 часа заменяют свежим.

Отобранные пробы органов фиксируют в растворе формалина 48 часов и промывают в течение 10 - 24 часов в проточной воде. Для приготовления и окраски целлоидиновых срезов обезвоженные кусочки патологического материала заключают в целлоидин. Из кусочков органов, наклеенных на блоки, приготовляют целлоидиновые срезы толщиной 5 - 10 мкм и окрашивают их гематоксилин-эозином или другими красителями, заключают в бальзам и покрывают покровным стеклом. Вместо целлоидиновых можно готовить парафиновые срезы.

Для приготовления и окраски парафиновых срезов кусочки органов, обезвоженные согласно пункту 6. Из парафиновых блоков готовят срезы толщиной 3 - 5 мкм, которые для расплавления необходимо поместить в теплую воду. Проведение исследования. Приготовленные срезы просматривают под световым микроскопом при естественном или искусственном освещении. Одновременно определяют наличие сопутствующих заболеваний нелейкозного характера с целью проведения дифференциальной диагностики или признаков, отягощающих основное заболевание отеки, воспаления, дистрофии, некрозы, кровоизлияния и пр.

В скелетной мускулатуре, сердце, печени, почках и других органах.

проба крови у крс

Оценка результатов гистологического исследования. При лимфоидном лейкозе в селезенке и лимфатических узлах наблюдают стирание рисунка за счет диффузных пролифератов из новообразованных клеток лимфоидного ряда в паракортикальной пульпе и синусах лимфоузлов и межфолликулярных пространствах селезенки. В костном мозге строма сохранена, выявляют значительное истончение и рассасывание балок, скопление клеток лимфоидного ряда, располагающихся в виде очагов или диффузно, заполняя все костномозговое пространство лимфоидная метаплазия.

Лейкоз крупного рогатого скота - хроническая инфекционная болезнь, вызываемая вирусом лейкоза крупного рогатого скота ВЛКРС. Лейкозом болеет крупный рогатый скот всех возрастов. Клинически болезнь проявляется чаще у животных в возрасте старше 4 лет.

В почках, печени, сердце, сычуге и других органах новообразованные клетки лимфоидного ряда образуют очаговые скопления или располагаются диффузно между клетками паренхимы органов. Скопление таких клеток выявляют в просветах капилляров и отмечают инфильтрацию ими интерстициальной ткани органов. В зависимости от степени зрелости клеток лимфоидного ряда, составляющих пролифераты и инфильтраты, различают лимфоцитарный, пролимфоцитарный и лимфобластный варианты лимфоидного лейкоза.

При недифференцированной форме лейкоза гемоцитобластоз , в костном мозге, селезенке, лимфатических узлах и других органах наблюдают очаговые и диффузные пролифераты, клеточный состав которых в основном представлен клетками типа гемоцитобласта, отмечают также клетки лимфоидного ряда различной степени зрелости. При гистиоцитарном лейкозе недифференцированный лейкоз, системный ретикулез размножение новообразованных клеток происходит в паракортикальной пульпе и синусах лимфоузлов, в селезенке - красной пульпе в межфолликулярных пространствах.

В других органах и тканях эти клетки обнаруживают в виде очаговых скоплений или диффузно расположенными между клетками паренхимы. Клеточный состав таких пролифератов и скоплений представлен полиморфными клетками, входящими в систему мононуклеарных макрофагов, гистиоцитами, клетками лимфоидного ряда. При миелоидном лейкозе встречается крайне редко в селезенке обнаруживают клетки гранулоцитарного ряда, мегакариоциты и клетки типа гемоцитобластов, выявляют распад и фрагментацию аргирофильных волокон.

В костном мозге - скопление клеток гранулоцитарного ряда различной степени зрелости; в лимфатических узлах, печени, почках, легких и других органах наблюдают очаговые и диффузные скопления клеток миелоидного ряда.

При лимфосаркоме в лимфатических узлах, органах пищеварения, воспроизведения, сердечной и скелетной мускулатуре, других органах и тканях отмечают диффузные и очаговые пролифераты клеток лимфоидного ряда.

В зависимости от преобладания определенного типа клеток различают лимфоцитарный, пролимфоцитарный, лимфобластный и плазмоцитарный варианты лимфосаркомы. При лимфосаркоме в селезенке и костном мозге изменений опухолевого характера не обнаруживают. Гистиоцитарная саркома отличается от лимфосаркомы по морфологической картине клеточного состава пролифератов, которые состоят в основном из гистиоцитов и других мононуклеарных макрофагов, отмечают также значительное количество атипичных многоядерных форм этих клеток.

В костном мозге и селезенке изменений опухолевого характера не отмечают. При лимфогранулематозе выявляют изменения опухолевого и воспалительного характера. Обнаруживают лимфоидноклеточные и полиморфноклеточные пролифераты, склеротические изменения, некрозы в лимфатических узлах, селезенке, печени и других органах.

Вы точно человек?

Костный мозг почти всегда остается интактным. Клеточный состав пролифератов при лимфогранулематозе представлен лимфоидными клетками различной степени зрелости, плазматическими клетками, эозинофилами, нейтрофилами, фибробластами и патогномоничными для этой формы лейкоза многоядерными гигантскими клетками Березовского-Штернберга. Серопозитивное животное считают больным лейкозом при обнаружении у него одного из следующих показателей:.

Животное в возрасте 6 месяцев, сыворотка крови которого дала положительную реакцию в РИД или ИФА, но не имеющее клинико-гематологических изменений, характерных для лейкоза, оценивают как животное с бессимптомной ВЛКРС-инфекцией.

Такое животное рассматривают как источник вируса лейкоза крупного рогатого скота и учитывают при организации противолейкозных мероприятий. С утверждением настоящих Методических указаний утрачивают силу "Методические указания по диагностике лейкоза крупного рогатого скота", утвержденные Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР в году.

Общие положения 1. По характеру и месту локализации опухолевых разрастаний, а также по морфологии и принадлежности пролиферирующих клеток к определенным росткам гемопоэза гемобластозы разделены на две группы: лейкозы - системные поражения органов кроветворения, включающие лимфоидную, миелоидную, моноцитарную и недифференцированную формы; гематосаркомы - сопровождающиеся опухолевым ростом.

Серологические методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота 2. Реакция иммунодиффузии РИД 2.

проба крови у крс

Оборудование и реактивы: - чашки Петри диаметром мм; - стандартный штамп-пробойник для просечения лунок в агаре; - пипетки пастеровские или автоматические со сменными наконечниками; - рН-метр; - осветитель; - хлорид натрия х. Постановка РИД. Учет и оценка результатов реакции. Метод иммуноферментного анализа ИФА 2. Существует две модификации иммуноферментного анализа: непрямой и конкурентный.

Материалы и оборудование. Для проведения исследования применяют: - микропипетки одноканальные автоматические; - микропипетки 8- или канальные автоматические; - фотометр одно- или многоканальный с автоматической регистрацией результатов. Непрямой иммуноферментный анализ для выявления антител к вирусу лейкоза. В состав диагностического набора входят: - антиген вируса лейкоза лиофилизированный и разбавитель антигена; - конъюгат антител против иммуноглобулинов крупного рогатого скота с пероксидазой или другим ферментом, жидкий или лиофилизированный, и разбавитель конъюгата; - сыворотки контрольные - отрицательная и положительная слабоположительная , лиофилизированные или жидкие; - разбавитель для сывороток и промывающий раствор, содержащий детергент и инертный белок; - субстрат ферментативной реакции; - микротитровальные полистироловые планшеты с 96 лунками.

Оценка результатов реакции. Возможна визуальная и инструментальная оценка результатов. Результаты оценивают по относительной величине ОВ , которую рассчитывают по формуле: где: ОП исп - средняя оптическая плотность испытуемой пробы; ОП к - средняя оптическая плотность отрицательного контроля; ОП фсб - средняя оптическая плотность холостой пробы. При установке "нуля прибора" по холостой пробе формула упрощается: Положительным считается испытуемый материал, ОВ которого больше или равна 2,0.

Отрицательным считается испытуемый материал, ОВ которого не превышает 1, Конкурентный иммуноферментный анализ для выявления антител к вирусу лейкоза. В состав диагностического набора входят: - антитела к ВЛКРС, адсорбированные в лунках МТП; - антиген вируса лейкоза; - конъюгат антител к ВЛКРС с пероксидазой или другим ферментом; - сыворотки контрольные - положительная, слабоположительная и отрицательная; - разбавитель для сывороток и промывающий раствор, содержащий детергент и инертный белок, предотвращающий неспецифическое связывание; - субстрат ферментативной реакции; - микротитровальные полистироловые планшеты с 96 лунками.

Визуальная оценка результатов включает: - оценку соответствия цвета продуктов ферментативной реакции характеристике, приведенной в наставлении по применению данного диагностического набора; - оценку окрашивания контрольных проб, на основании которого определяется специфичность и активность диагностического набора.